产品说明
hs-taq dna聚合酶是抗体封闭的热稳定聚合酶,在室温条件下聚合酶活性完全被抑制,从而避免了在配制pcr反应体系等操作过程中产生非特异性扩增和引物二聚体。配合优化的buffer体系,在普通pcr和荧光定量pcr(sybr green染料法、探针法)均有较好的适用性。产生的pcr产物3´端含有单da核苷酸突出,因此该pcr产物可直接用于ta克隆。
产品特点
灵敏度高:卓越的扩增灵敏度,满足低模板需求;
优异的多重扩增能力:同时检测多种靶标基因,可适用于多重pcr试剂盒开发;
稳定性好:37℃放置14天、冻融40次,试剂性能稳定;
产品应用
适于常规pcr反应,复杂模板,低拷贝模板等的扩增
多重pcr实验
定量pcr实验等
产品数据
1、与竞品酶对比测试
图1. 使用某品牌探针检测试剂盒,用 csb-dem024 hs-taq dna polymerase替代试剂盒中组分进
行qpcr,可以看出 hs-taq dna polymerase在灵敏度和扩增效率上均有一定提升。
2、加速稳定性
图2. csb-dem024 hs-taq dna polymerase 37℃加速热稳定性
3、特异性扩增能力
模板:人基因组dna
line 1、2、3:热启动taq dna聚合酶
line 4、5、6:普通taq酶
m:trans2k dna marker
图3. csb-dem024 hs-taq dna polymerase特异性扩增能力
产品组分
产品参数
操作说明
pcr 推荐使用方法
【注】:a.引物浓度:一般来说反应体系中引物终浓度为0.2um即可得到较好的效果。反应性能较差时,可在终浓度0.1um-1.0um范围内调整引物浓度。
b.模板浓度:动植物基因组dna 0.1~1ug,大肠杆菌基因组dna 10~100 ng,λdna 0.1~10 ng,质粒dna 0.1~10 ng。如模板为未稀释cdna原液,使用体积不应超过qpcr反应总体积的1/10。
c.聚合酶浓度:酶量可在0.25 - 1ul之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。
d.荧光定量pcr:使用本产品进行荧光定量pcr时,在上述推荐体系中,加入终浓度1×sybr green i(染料法)或是0.3 μl 10μm taqman probe(探针法)。
【注】:e.荧光定量pcr程序:(染料法)95℃ 2min;95℃ 10s,56℃ 30s*,40cycles;melt curve stage;
(探针法)95℃ 1min;95℃ 10s,56℃ 30s*,40-45cycles。
f.退火温度和时间:退火温度需要根据引物的tm值进行调整,一般设置成低于引物tm值3 ~ 5℃即可。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。