产品说明
hifi dna polymerase是一种基于pfu dna polymerase改造而成的新一代高保真dna聚合酶,和pfu dna polymerase相比,hifi dna polymerase的性能得到大幅度提升,针对复杂的模板也能快速准确的完成pcr反应。其保真性显著提高。本产品配备了优化后的酶缓冲液,添加了pcr增强组分,使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,适合复杂模板的扩增。其扩增产物为平末端。
产品介绍
hifi dna polymerase是一种基于pfu dna polymerase改造而成的新一代高保真dna聚合酶,和pfu dna polymerase相比,hifi dna polymerase的性能得到大幅度提升,针对复杂的模板也能快速准确的完成pcr反应。其保真性显著提高。本产品配备了优化后的酶缓冲液,添加了pcr增强组分,使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,适合复杂模板的扩增。其扩增产物为平末端。
产品特点
纯度>95%,无核酸酶残留,宿主gdna残留量低;
保真度高出 taq 保真度百倍以上;
高效扩增高 gc 含量靶标、纯度不佳的 dna 和长片段序列;
可提供含或不含上样染液的预混液。
产品应用
长片段pcr扩增
高gc模板扩增
dna片段的克隆
产品数据
line 1-4:高gc gdna 1k、0.7k、0.5k、0.4k(gc含量60-80%)
line 5-8:λ dna 1k 、4k、6k、8k
图1. csb-dem042 hifi⾼保真dna聚合酶
产品组分
产品参数
操作说明
【注】:a.引物浓度:一般来说反应体系中引物终浓度为0.2um即可得到较好的效果。反应性能较差时,可在终浓度0.1um-1.0um范围内调整引物浓度。
b.模板浓度:动植物基因组dna 0.1~1ug,大肠杆菌基因组dna 10~100 ng,λdna 0.1~10 ng,质粒dna 0.1~10 ng。如模板为未稀释cdna原液,使用体积不应超过qpcr反应总体积的1/10。
c.聚合酶浓度:酶量可在0.25 - 1ul之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。
d.mg2 和添加剂:大部分pcr反应体系中的mg2 浓度应在1.0–5.0 mm范围之内,但对于一些扩增困难的样本,例如高gc的dna样本,可能需要在pcr反应体系中加入添加剂,例如dmso或甲酰胺等。
【注】:e.退火温度和时间:退火温度需要根据引物的tm值进行调整,一般设置成低于引物tm值3 ~ 5℃即可。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。