普通pcr引物设计|通用引物合成原料|荧光定量引物 -8846威尼斯
- 次日交付
- 多种纯化方式
- 工艺更稳定
服务特色
金开瑞拥有目前主流的dr.oligo192高通量引物合成仪、专业的技术人员及成熟的合成纯化方法，可提供高质量、多种类的引物合成服务。rpc、page、hplc等多种纯化方式，保证质量和及时的交货时间，武汉地区次日即可交付。
服务介绍
普通引物是指在pcr反应中作为引导dna扩增的引物，通常由18-25个碱基组成，可以与目标dna序列特异性结合，并提供dna聚合酶催化合成新dna链所需的3'端。普通引物通常用于常规pcr反应中，包括基因表达分析、病原体检测、基因型鉴定等应用。普通引物的合成和设计非常常见和标准化，通常可以在引物库中找到现成的引物，也可以根据需要定制合成，具有成本低、操作简便等优点。引物合成可用于pcr、测序、全基因合成、亚克隆、点突变、载体构建、rna干扰和基因重组等实验。根据不同的用途，可选择不同的纯化方式。
服务优势
- 先进：采用世界上先进的合成仪制造商blp 公司生产的nm级别的dr.oligo192高通量dna合成仪，使引物合成更快速、更安全、更稳定；
- 快速：3h内可以合成192条30个碱基以内的引物；常规rpc、dsl、opc纯化引物24h内发货，武汉地区次日即可交付；
- 安全：采用气相氨解的原理，改进的氨解方式，可以在90min内使引物氨解的更快更完全，并且避免由于其他试剂氨解带来的不必要的突变；
- 优质：多种纯化方式，多重质量检测手段（hplc、ms），全面保证我们发货的质量。
服务流程
客户提供
引物合成订购表：需详细填写客户信息、序列、碱基数、纯化方式等信息。
最终交付
- 对应合成量的引物冻干粉；
- 引物操作说明书。
服务说明
| 纯化方式 | 引物长度 | 产量(od) | 发货时间 |
| rpc纯化 | 8-15nt |
1-2 |
1工作日 |
| 2-4 | 1工作日 | ||
| 15-59nt |
1-4 |
1工作日 | |
| 5-10 | 1工作日 | ||
| 10-15 | 1工作日 | ||
| 15-20 | 1工作日 | ||
| ＞20 | 1工作日 | ||
| 60-120nt | 1-2 | 3工作日 | |
| 2-5 | 3工作日 | ||
| ＞5 | 3工作日 | ||
| page纯化 | 15-59nt |
1-2 |
3工作日 |
| 3-4 | 3工作日 | ||
| 5-8 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 60-80nt | 1-2 | 3工作日 | |
| 3-4 | 3工作日 | ||
| 5-8 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 80-100nt | 3 | 3工作日 | |
| 3 | 3工作日 | ||
| 3 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 100-120nt | 1 | 3工作日 | |
| 2 | 3工作日 | ||
| hplc纯化 | 8-15nt |
1-2 |
3-5工作日 |
| 3-4 | 3-5工作日 | ||
| 15-59nt | 1-4 | 3-5工作日 | |
| 5-8 | 3-5工作日 |
常见问题与解析 (q&a)
两条引物退火成功率达不到百分之百，里面会存在单链引物，引物退火后跑胶有杂链很正常，不能以此来判断单链引物纯度。
基因合成，尤其是难度基因和长片段基因，有可能造成延期，因此我们只能保证绝大多数基因按期交付。对于延期项目，我们的8846威尼斯的技术支持会给您及时汇报进展。目前并没有任何公司保证延期后减免费用
相关资源
1、引物合成实验中的专属名词及解释
● oligo（oligonucleotide）：oligo是指短链的寡聚核苷酸，通常由20到200个碱基组成。在引物合成实验中，引物往往是一种特定长度的oligo。
● 反向合成（reverse synthesis）：在引物合成实验中，反向合成指从3'端到5'端逐个加入核苷酸单元，合成引物的过程。
● 脱保护（deprotection）：在引物合成中，引物的核苷酸单元通常被保护基团保护，以防止在反应过程中发生意外的化学反应。脱保护是指去除这些保护基团的过程，使得引物的核苷酸单元可用于进一步的化学反应。
● hplc（high-performance liquid chromatography）：高效液相色谱法，一种常用的分离和纯化技术，可用于分离和纯化合成的引物。
● page（polyacrylamide gel electrophoresis）：聚丙烯酰胺凝胶电泳法，一种常用的dna片段分析技术，可以用于评估引物的纯度和大小。
2、引物的保存与使用注意事项
● 引物保存的注意事项：
▶ 储存温度：将引物储存在干燥的条件下，通常在-20°c或更低的温度下。避免频繁的冻融循环，因为这可能导致引物的降解。
▶ 避光保护：引物应储存在避光的条件下，以防止光照引发的降解反应。使用不透明的冷冻管或管盒来保护引物。
▶ 防潮防湿：确保引物储存环境干燥，避免湿气的进入。可以使用干燥剂或密封性良好的储存容器来防止湿气侵入。
● 引物使用的注意事项：
▶ 引物质量控制：在使用引物之前，进行引物的质量控制验证，如测序确认引物序列的准确性或质谱分析验证纯度。
▶ 合理稀释：根据实验需求，合理稀释引物至适当的工作浓度。确保稀释过程中的准确度和标记清晰度。
▶ 正确温度：在实验中，根据引物的要求和扩增反应的最佳温度，严格控制反应温度。避免超过引物的最大耐受温度。
▶ 避免污染：使用无菌技术和无菌操作条件，避免引物受到外源性的污染。使用专用的无菌技术器材和操作区域。
▶ 单次使用：为避免引物的降解和污染，一次性使用所需量的引物，并避免重复冻融。
3、引物合成的实验举例
● pcr（聚合酶链式反应）：pcr是一种常用的基因扩增技术，引物在pcr反应中用于选择性地扩增目标dna序列。
● 实时定量pcr（qpcr）：qpcr用于准确测量目标dna或rna的数量，引物在qpcr实验中用于扩增目标序列并进行定量分析。
● dna测序：引物在dna测序中用于扩增待测序列的片段，以便进行测序反应。
● rna pull-down：rna pull-down实验用于研究rna与蛋白质的相互作用。引物在该实验中用于捕获目标rna分子，并与其结合的蛋白质一起纯化和分析。
● 基因突变分析：引物在基因突变分析中用于扩增目标基因的特定区域，以便进行突变检测和分析。
● 基因克隆：引物在基因克隆中用于扩增目标基因的特定区域，以便将其插入到表达载体或矢量中。
● 限制性片段长度多态性（rflp）分析：引物在rflp分析中用于扩增目标基因的特定区域，以便进行限制性酶切并分析不同基因型的片段长度差异。
4、用于引物合成设计、分析和操作的在线工具简介
● primer3 ：primer3常用的在线引物设计工具，可以根据用户提供的目标序列信息，自动设计适合的引物序列，并提供引物参数和特性分析。（primer3.ut.ee）
● idt scitools ：idt scitools提供了多个在线工具，包括引物设计、引物分析、序列优化和酶切位点分析等。其中包括了引物设计、tm值计算、二聚体结构预测等功能。（idtdna.com/pages/tools）
● oligoanalyzer：oligoanalyzer是idt提供的在线工具，用于分析引物的理化特性，包括tm值、二聚体结构、gc含量、末端稳定性等。（idtdna.com/pages/tools/oligoanalyzer）
● ncbi primer-blast：ncbi primer-blast是由国家生物技术信息中心（ncbi）提供的在线工具，用于引物设计和特异性分析。它可以设计引物，并对其在基因组中的特异性进行评估。（ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/）
● ucsc in-silico pcr：ucsc in-silico pcr是ucsc基因组浏览器提供的在线工具，可以通过输入引物序列，在基因组上进行虚拟pcr，并可视化pcr产物的位置。（genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgpcr）
● snapgene：snapgene是一款商业软件，提供了在线版本和桌面版本。它可以用于引物设计、序列编辑、限制性酶切模拟和克隆操作等。在线版本允许用户进行一些基本的引物设计和序列分析操作。（snapgene.com）
