chip-seq

chip-8846威尼斯

  • 三次质控
  • 自用抗体平台
  • 项目经验丰富

服务特色

chip-seq是目前最成熟的蛋白质与dna互作研究方法,金开瑞自有抗体平台、检测分析平台,前后三次质控,可最大限度的保障实验成果率。

服务介绍

chip-seq(chromatin immunoprecipitation sequencing)是染色质免疫共沉淀和第二代高通量测序技术的结合,通过组蛋白/转录因子的特异性抗体,将特定的蛋白与dna复合物沉淀下来。从而获取结合的dna片段,再通过高通量测序技术,即可获得相应的片段信息。

服务优势

  • 项目前后三次质控,保障实验成功率;
  • 金开瑞自有抗体生产团队,选择抗体经验丰富;
  • 细胞、植物、动物都有大量经验。

服务流程

样本准备及交联
dna片段化及富集
文库质检
测序
生信分析

客户提供

根据《武汉金开瑞表观项目送样指南》提供实验的样品,并提供chip级别抗体(公司可以提供选购意见)。

样品信息单:需详细填写样品来源、含量、状态及其他基本信息。

最终交付

  • 项目报告与数据:
  • 测序数据质量评估:过滤掉低质量数据,保证数据质量
  • 与参考基因组比对:reads分布及比对结果可视化
  • peak峰calling:分析蛋白结合位点
  • motif分析:蛋白结合序列的偏好性
  • peak峰相关基因注释:寻找蛋白潜在调控基因
  • 差异peak分析:分析不同样本间差异peak峰
  • 相关基因功能分析:相关基因go, kegg富集分析

服务说明

产品

测序数据量

平台

周期(自然日,提取 测序分析)

备注

组蛋白chip-seq

8g

illumina

45

 需要组间比较时,每组至少两个生物学重复,每个样本会进行chip和input测序

转录因子chip-seq

6g

illumina

45

 需要组间比较时,每组至少两个生物学重复,每个样本会进行chip和input测序

案例展示

常见问题与解析 (q&a)

q:chip-seq中的测序dna样本需要多少产量?

通常是≥10ng。随着目前建库技术的不断完善,低至5ng的dna量也能被建库成功;少数测序公司为了降低自身风险提出20ng的要求,通过可以协商降低该送样要求。尤其是一些转录因子,最终能够捕获的dna量会很低。

q:chip-seq中的测序dna样本需要多少产量?

通常是≥10ng。随着目前建库技术的不断完善,低至5ng的dna量也能被建库成功;少数测序公司为了降低自身风险提出20ng的要求,通过可以协商降低该送样要求。尤其是一些转录因子,最终能够捕获的dna量会很低。

相关资源

1、chip-seq技术的实验步骤:

    ● 交联与裂解:交联细胞或组织中蛋白质与dna的相互作用,然后裂解细胞核,释放染色质。

    ● 免疫沉淀:使用特定抗体对目标蛋白质进行免疫沉淀,富集与该蛋白质结合的染色质片段。

    ● 反交联与dna纯化:解除交联,将富集的染色质片段纯化出来。

    ● 文库构建:对富集的dna片段进行文库构建,将其转化为可测序的dna文库。

    ● 高通量测序:对构建好的dna文库进行高通量测序,产生数百万个短的dna序列读数。

    ● 数据分析:将测序数据进行比对,将序列读数映射到参考基因组上,并根据比对结果寻找与特定蛋白质结合的染色质区域。

 

2、chip-seq技术在基因组学研究中有着广泛的应用,包括但不限于:

    ● 转录因子结合位点鉴定:chip-seq可以帮助鉴定转录因子与基因组上的结合位点,揭示转录因子对基因调控的作用。

    ● 组蛋白修饰分析:chip-seq可以用于检测不同组蛋白修饰在基因组上的分布,如甲基化、乙酰化等,揭示染色质状态和基因表达的调控。

    ● 基因调控网络研究:chip-seq可以帮助构建基因调控网络,找出转录因子和其他调控因子与靶基因的相互作用关系。

    ● 疾病研究:chip-seq可以用于研究特定蛋白质在疾病发生和发展中的作用,如癌症等。

    ● 药物靶点发现:chip-seq可以帮助鉴定新的药物靶点,为药物研发提供新的目标。

 

3、chip-seq数据库资源和网站:

    ● encode chip-seq data portal:

       encode是一个重要的国际合作项目,其chip-seq data portal提供了大量的chip-seq数据和相关的实验信息。用户可以通过该网站获取不同细胞类型和条件下的chip-seq数据。(encodeproject.org/data-standards/chip-seq/)

 

    ● geo - gene expression omnibus:

       geo是一个公共数据库,提供了许多chip-seq数据集,包括原始的测序数据和已经分析过的结果。可以通过关键词搜索或浏览数据集来获取感兴趣的chip-seq数据。(ncbi.nlm.nih.gov/geo/)

 

    ● chip-atlas:

       chip-atlas是一个综合性的chip-seq数据库,提供了广泛的chip-seq数据集和相关的元数据信息。它支持chip-seq数据的交互式可视化和数据下载。(chip-atlas.org)

 

    ● cistrome data browser:

       cistrome data browser是一个基因组调控数据的综合性数据库,包括chip-seq数据和相关的基因表达数据,可以用于基因调控网络的研究。(cistrome.org/db/#/)

 

    ● ucsc genome browser:

       ucsc genome browser是一个广泛使用的基因组浏览器,它提供了许多公开共享的chip-seq数据集,并且可以与其他组学数据进行整合展示。(genome.ucsc.edu/)

 

    ● chipseeker:

       chipseeker是一个r包,用于chip-seq数据的注释和可视化,可以帮助研究者解释和分析chip-seq结果。(bioconductor.org/packages/release/bioc/html/chipseeker.html)

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