细胞迁移及侵袭|细胞检测实验|细胞培养 -8846威尼斯
- 细胞迁移
- 细胞侵袭
- transwell
- 趋化因子
- 透明质膜孔板
服务特色
transwell实验是一种常用的细胞迁移和侵袭能力评估方法，通过透明质膜孔板模拟体内环境，提供简单易行、可定量测量和高可重复性等特色，广泛应用于细胞迁移和侵袭研究。
服务介绍
transwell是一类有通透性的杯状的装置，放入培养板后，分为两室：transwell小室内称上室，盛装上层培养液；培养板内称下室，盛装下层培养液。上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，以此研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。transwell检测技术服务，用于测定细胞迁移及侵袭。
服务优势
- 简单易行：transwell实验操作相对简单，不需要复杂的设备和技术，降低了实验的难度和门槛。
- 可定量测量：transwell实验可以通过染色或其他方法准确测量下室中迁移或侵袭的细胞数量，提供可靠的数据支持，便于对细胞迁移和侵袭能力进行定量分析。
- 高可重复性：透明质膜孔板具有一致的微孔结构，保证实验的重复性和可比性，减少实验误差，使得实验结果更具可信度。
- 模拟体内环境：transwell实验中透明质膜孔板模拟细胞在体内组织间迁移和侵袭的生理环境，有助于更真实地研究细胞行为和生理过程。
- 灵活性强：transwell实验可根据研究需要选择不同孔径的透明质膜孔板，适用于不同细胞类型和研究对象，具有较大的灵活性。
- 适用于高通量筛选：transwell实验可以批量进行，适用于高通量筛选药物或影响细胞迁移、侵袭的因素，提高了实验的效率和产出。
服务流程
客户提供
生长状态良好的实验细胞及细胞培养条件（冻存细胞需用干冰运输，培养细胞样品用装满培养液的培养瓶寄送，瓶口用封口膜封好）；
需准确告知实验设计内容，如样本浓度等，并提供实验所需药物等。
最终交付
- 实验原始数据、图片、分析结果；实验流程及完整报告一份
服务说明
| 服务项目 | 细分 | 注释 | 服务周期（工作日） |
| 细胞迁移/细胞侵袭 | transwell（不用matrigel） | 用于检测细胞迁移 | 12 |
| transwell（用matrigel） | 用于检测细胞侵袭 |
案例展示
常见问题与解析 (q&a)
transwell小室上下层由聚碳酸酯膜分隔，膜上有3-8μm不同规格孔径的小孔。不铺matrigel胶时细胞的穿膜过程体现其迁移能力；当铺有matrigel胶时细胞穿膜需分泌基质金属蛋白酶（mmps）等基质水解酶类，此时体现的是细胞的侵袭能力。所得数据为显微镜下拍照及细胞计数结果。
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1、transwell实验步骤
● 预处理透明质膜孔板：将透明质膜孔板浸泡在适当的溶液中，如无菌pbs或细胞培养基，去除可能的残留物质，确保透明质膜孔板的清洁和无菌。
● 细胞处理：将需要研究的细胞分散成单细胞悬浮液，根据实验需要，可预处理细胞，例如暴露于趋化因子或药物。
● 上室孔板装配：将预处理后的细胞悬浮液加入透明质膜孔板的上室，注意控制细胞数量和浓度，确保均匀分布。
● 下室孔板装配：在透明质膜孔板的下室中加入相应的培养基，通常含有趋化因子或其他试剂，以吸引细胞迁移或侵袭。
● 孔板培养：将上下室装配的透明质膜孔板置于细胞培养箱中，进行培养，根据研究需要，可以调节培养时间。
● 细胞固定和染色：培养结束后，取出透明质膜孔板，将细胞固定，通常使用甲醛或乙醇等，然后进行染色。
● 细胞观察和计数：观察透明质膜孔板上下室中的细胞，根据实验目的选择适当的染色方法进行细胞计数或其他定量分析。
● 数据分析：根据实验结果进行数据统计和分析，比较不同组别的细胞迁移或侵袭能力。
transwell实验可以根据研究目的进行适当的调整和改进，实验步骤可能会因具体实验设计而有所差异。
2、研究细胞迁移和侵袭的方法对比介绍
|
方法名称 |
简介 |
优点 |
试用范围 |
局限性 |
|
transwell实验 (透明质膜孔板法) |
通过透明质膜孔板模拟细胞迁移和侵袭，定量测量细胞数量 |
定量化测量细胞数量，高通量筛选 |
适用于体外细胞迁移和侵袭评估，高通量筛选等 |
无法模拟组织间的复杂环境，不适用于体内实验 |
|
scratch实验 (划痕实验) |
在细胞培养皿中形成划痕，观察细胞填充划痕的能力 |
简单易行 |
适用于初步评估细胞迁移能力，简单易行 |
无法模拟体内环境，只能提供定性信息 |
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boyden室外实验 (boyden室外迁移实验) |
利用孔板上下两室的梯度形成细胞迁移差异，评估细胞迁移能力 |
相对简单，不需要特殊设备 |
适用于体外细胞迁移评估，操作相对简单 |
不适用于定量测量，无法模拟复杂的体内情况 |
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3d细胞迁移模型 (三维细胞迁移模型) |
使用三维结构模拟细胞迁移，贴近体内环境 |
贴近体内环境，更贴近真实情况 |
适用于模拟复杂的生理环境，更贴近体内情况 |
实验步骤复杂，需要特殊设备，较为耗时 |
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软琼脂膜法 (软琼脂孔板法) |
在琼脂膜上培养细胞，观察细胞在软质基质上的迁移能力 |
适用于生物力学研究，模拟软组织环境 |
只能提供定性信息，不适用于定量测量 |
需要特殊琼脂膜基质和培养条件 |
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体内实验 |
使用动物模型研究细胞迁移和侵袭过程，具有较高的生物学相关性 |
较高的生物学相关性，模拟复杂体内环境 |
适用于研究细胞在复杂体内环境下的行为 |
涉及动物实验，存在伦理和法规限制，费用较高 |
3、transwell的应用举例
● 癌症研究：transwell可用于评估癌细胞的侵袭和转移能力，研究肿瘤转移机制和药物干预。例如，通过在transwell上层培养癌细胞，并在下层添加模拟肿瘤组织的基质，可以模拟肿瘤细胞侵袭过程，并评估抑制剂对侵袭的影响。
● 免疫学研究：transwell可用于研究细胞迁移和细胞-细胞相互作用对免疫细胞活性的影响。例如，通过在transwell上层培养免疫细胞，并在下层添加刺激物质，可以模拟炎症反应或免疫细胞之间的相互作用。
● 神经生物学研究：transwell可用于模拟神经元迁移和轴突生长过程，研究神经发育和修复机制。例如，通过在transwell上层培养神经细胞，并在下层添加趋化因子，可以评估神经元迁移和轴突生长的能力。
● 细胞信号传导研究：transwell可用于研究细胞间信号传导和细胞-细胞相互作用对细胞功能的调控。例如，通过在transwell上层培养信号发出细胞，并在下层添加接受细胞，可以模拟细胞间的信号传导和相互作用。
● 药物筛选和药物透过性研究：transwell可用于评估化合物的透过性和细胞摄取能力，以进行药物筛选和药物传递研究。例如，通过在transwell上层培养细胞，并在上下层分别添加药物溶液，可以评估药物的透过性和细胞摄取情况。
