分子互作 | 酵母双杂交应用-8846威尼斯

  酵母杂交技术背景  

    由fields和song等人最初建立的主要为酵母双杂交系统，它是一种研究真核生物细胞蛋白之间的相互作用的分子生物学技术，其后在此基础上，又进一步开发了用于研究dna与蛋白质之间相互作用的酵母单杂交，膜定位蛋白之间相互作用的膜酵母双杂交以及rna与配体之间相互作用的酵母三杂交等多项技术，为研究生物体内的功能作用机制提供了更加完善和严谨的研究手段。

  核酵母双杂交技术原理  

    酵母转录因子gal4包含dna结合结构域（gal4-bd）和转录激活域（gal4-ad），诱饵（prey）与gal4-bd融合，猎物（bait）蛋白与gal4-ad融合，当诱饵蛋白和猎物蛋白发生相互作用时，gal4-bd和gal4-ad在空间上充分接近，可呈现完整的gal4转录因子活性，启动激活酵母菌株的报告基因aur1-c、ade2、his3和mel1的转录，并以缺陷培养和颜色反应的结果得以呈现。

  应用方向  

核酵母双杂交应用于转录因子调控化合物的生物合成途径

转录因子nnwrky70a和nnwrky70b正向调节荷花中bia生物合成[1]

核酵母双杂交应用于病原体破坏宿主免疫系统功能机制研究

细菌f-box效应物通过介导水稻中ostrxh2的蛋白酶体降解来抑制sar免疫[2]

膜酵母双杂交应用于胁迫环境下的抗性治疗发现

通过筛选文库得到相互作用蛋白为非肌球蛋白ii型(myo1p)功能研究提供新见解[3]

膜酵母双杂交应用于蛋白新功能的发现

跨膜蛋白pra1在早期分泌阶段的功能研究方向[4]

  技术服务  

参考文献：

[1] li j, li y, dang m, li s, chen s, liu r,zhang z, li g, zhang m, yang d, yang m, liu y, tian d and deng x(2022) jasmonate-responsiv transcription factors nnwrky70a and nnwrky70b positively regulatebenzylisoquinoline alkaloid biosynthesis in lotus (nelumbo nucifera). front. plant sci. 13:862915. doi: 10.3389/fpls.2022.862915.

[2] hongtao ji, et al. a bacterial f-box effector suppresses sar immunity through mediating the proteasomal degradation of ostrxh2 in rice plant j. 2020 nov;104(4):1054-1072.doi: 10.1111/tpj.14980. epub 2020 oct 14.

[3] santiago, ednalise; akamine, pearl; snider, jamie; wong, victoria; jessulat, matthew; deineko, viktor; gagarinova, alla; aoki, hiroyuki; minic, zoran; phanse, sadhna; san antonio, andrea; cubano, luis a; rymond, brian c.; babu, mohan; stagljar, igor; and rodriguez-medina, jose r., "novel interactome ofsaccharomyces cerevisiae myosin type ii identified by a modified integrated membrane yeast two-hybrid (imyth) screen" (2016). biology faculty publications . 106.

[4] ameair abu irqeba,judith mosinger ogilvie(2019). novel binding partners forprenylated rab acceptor 1 identified by a split-ubiquitin yeast two-hybrid screen. https://doi.org/10.1186/s13104-019-4219-y.