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rip 技术（rna binding protein immunoprecipitation assay，rna 结合蛋白免疫沉淀）主要是运用针对目标蛋白的抗体把相应的rna-蛋白复合物沉淀下来，经过分离纯化就可以对结合在复合物上的rna 进行q-pcr验证或者测序分析。rip 是研究细胞内rna 与蛋白结合情况的技术，是了解转录后调控网络动态过程的有力工具，可以帮助我们发现mirna 的调节靶点。

根据需求，金开瑞可以提供rna/蛋白、rna/rna互作验证rip技术服务。

在金开瑞进行rip技术服务，您需要提供目的蛋白抗体（可用于ip）及其说明书；需检测的细胞样品；目的基因、目的蛋白信息。

实验完成后，金开瑞所交付的结果包含：原始数据、结果图片（包括阴性对照结果）；标准实验报告（包括详细的材料与方法）；sci标准result figure。

1) 已知蛋白与已知rna互作qpcr验证；已知蛋白与未知rna互作二代测序筛选。

2) 已知rna与已知rna互作qpcr验证；已知rna与未知rna互作二代测序筛选。

1) 防止rna与蛋白非特异性结合。

2) 避免rna蛋白质结合被破坏。

3) 避免外源rnase污染。

4) 抑制内源rnase的活性。

5) 避免rna结合蛋白的降解；

6) 选择适合做rip的抗体，一定要是ip级别的抗体。

7) 细胞的选择，对于需要做转染实验的需要选择转染效率较高的、rna在细胞中本底表达量要相对较高的

1) 先进行ip或者wb，测试抗体可以与目标rbp结合。

2) 另选一个能与抗原其他表位结合的抗体。

3) 尽可能选用密理博ripab 抗体。

4) 稀释抗体成浓度梯度，进行ip测试。

5) 4℃过夜孵育抗体与rip裂解液。

6) 确定抗体类型与protein a/protein g匹配。

理论上，可以采用能分别抽提核浆蛋白的蛋白抽提kit先分离样本，再进行rip实验。但需要特别注意的是所用kit中的reagent不能有rnase和dnase，以及要能与下游的抗体beads孵育兼容。